Ocena mitochondrialnej drogi indukcji sygnału do apoptozy wywołanej L-argininą w hepatocytach szczura
Słowa kluczowe:
tlenek azotu, apoptoza, kaspaza 9, białka Bcl-2, wątrobaAbstrakt
Wewnętrzna droga indukcji sygnału do apoptozy jest aktywowana przez stres komórkowy. Droga ta angażuje mitochondria w po-średnio i bezpośrednio. Celem obecnej pracy była immunohistochemiczna ocena ekspresji białek kaspazy 9, bax, bcl-2 zaangażowanych w mitochondrialną drogę śmierci komórki podczas apoptozy hepatocytów szczura indukowanej L-argininą.
Szczury użyte w niniejszej pracy zostały podzielone na 2 równe grupy. Zwierzęta z grupy doświadczalnej otrzymywały L-argininę - 40mg/kg masy ciała per os co drugi dzień przez 2 tygodnie i zostały dekapitowane po 3 tygodniach doświadczenia. Szczury z grupy kontrolnej dostawały 2ml wody destylowanej per os co drugi dzień i zostały dekapitowane po 3 tygodniach doświadczenia.
Wycinki wątroby pobrane do analizy były oceniane immunohistochemicznie przy użyciu standardowej trójstopniowej metody by wykryć immunolokalizację kaspazy 9, bax i bcl-2. Wyniki badań były oceniane jakościowo opisując intensywność i lokalizację dodatnie-go barwnego odczynu w miejscu pojawiania się reakcji antygen-przeciwciało. Do oceny ilościowej użyto programu komputerowego Analysis-pro i obliczono pole powierzchni zajętej dodatnim odczynem.
Badania wykazały ,że L-arginina jako prekursor egzogennego tlenku azotu nie aktywuje mitochondrialnej drogi indukcji sygnału do apoptozy przez pośrednie i bezpośrednie uszkodzenie mitochondriów w hepatocytach i aktywację kaspazy 9 i białka bax.
Bibliografia
1. Maleck W.H., Piper S.N., Koetter K. Joseph Priestley, nitrous oxide and oxygen. Anaesthesist, 2005; 54: 395-396.
2. Hibbs J.B. Jr, Taintor R.R., Vavrin Z., Rachlin E.M. Nitric oxide: a cytotoxic activated macrophage effector molecule. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1988; 157: 87-94.
3. Ignarro L.J. Endothelium derived nitric oxide: actions and properties. FASEB J., 1989; 3: 31-36.
4. Laskowska E. Małe białka szoku termicznego – rola w apoptozie, karcynognezie i chorobach związanych z agregacją białek. Postępy Bioch., 2007; 53: 19-26.
5. Kaźmierczuk A. HSP 27 antyoksydacyjne właściwości, które chronią komórki nerwowe przed uszkodzeniem i zapobiegają wielu chorobom neurodegeneracyjnym. Postęp. Hig. Med. Dośw., 2010; 64: 273-283.
6. Bielak-Żmijewska A. Mechanizmy oporności komórek no– wotworowych na apoptozę. Kosmos. Problemy Nauk Biologicznych, 2003; 52: 157-171.
7. Igney F.H., Krammer P.H. Death and anti-death: tumor resistance to apoptosis. Nat. Rev. Cancer, 2002; 2: 277-288.
8. Eu J.P., Liu L., Zeng M., Stamler J.S. An apoptotic model for nitrosative stress. Biochemistry, 2000; 39: 1040-1047.
9. Wolter K.G., Hsu Y.T., Smith C.L., Nechushtan A., Xi X.G., Youle R.J. Movement of BAX from the cytosol to mitochondria during apoptosis. J. Cell. Biol., 1997; 139: 1281-1292.
10. Castedo M., Hirsch T., Susin S.A., Zamzami N., Marchetti P., Macho A., Kroemer G. Sequential acquisition of mitochondrial and plasma membrane alterations during early lymphocyte apoptosis. J. Immunol., 1996; 157: 512-521.
11. Domiński Z. Apoptoza: śmierć komórek w życiu organizmów zwierzęcych. Kosmos, 1999; 48: 385-396.
12. Hockenberry M. Bcl-2 is an inner mitochondrial membrane protein that blocks programmed cell death. Nature, 1990; 348: 334-338.
13. Pryjma J. Monocyty krwi obwodowej – apoptoza po fagocytozie bakterii oraz zmiany funkcjonalne w następstwie kontaktu z komorkami apoptotycznymi www. fnp.org.pl/programy aktualne/jachranka/profPryjma.pdf. 2004, 1-19.
14. Cherla G., Jaimes E.A. Role of L-arginine in the pathogenesis and treatment of renal disease. J. Nutr. 2004; 134: 2801S-2806S.
15. Rytlewski K., Olszanecki R., Korbut R., Zdebski Z. Effects of prolonged oral supplementation with l-arginine on blood pressure and nitric oxide synthesis in preeclampsia: Eur. J. Clin. Invest., 2005; 35: 32-7.
Pobrania
Opublikowane
Numer
Dział
Licencja
Prawa autorskie (c) 2011 Autorzy
Praca jest udostępniana na licencji Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 3.0 Unported License.
