Kaspaza 8 maker zewnętrznej drogi przewodzenia sygnału do apoptozy w śmierci hepatocytów szczura wywołanej egzogennym tlenkiem azotu

Abstrakt

Celem pracy była immunohistochemiczna ocena eksresji kaspazy 8 podczas apoptozy hepatocytów szczura wywołanej L-argininą – substratem tlenku azotu (NO).

Szczury użyte w doświadczeniu zostały podzielone na dwie równoliczne grupy. Doświadczalne szczury dostawały per os L-argininę 40mg/kg masy ciała co 2-gi dzień przez 2 tygodnie i zostały dekapitowane po 3 tygodniach. Kontrolne szczury dostawały per os 2ml wody destylowanej co 2-gi dzień przez 2 tygodnie i zostały dekapitowane również po 3 tygodniach. Wycinki wątroby wzięte po dekapitacji zostały zbadane immunohisto-chemicznie przy użyciu standardowej trzystopniowej metody w celu wykrycia immunolokalizacji kaspazy 8. Wyniki badań zostały przedstawione jakościowo – opis intensywności barwnej reakcji w miejscu poszukiwanego białka w wątrobie szczurów. Ilościowej oceny wyników badań dokonano przy użyciu programu komputerowego Analysis-pro – liczono pole powierzchni zajętej przez barwną reakcję antygen-przeciwciało.

Ilościowa ocena ekspresji kaspazy 8 wskazała, że pole powierzchni zajętej przez dodatni odczyn dla tego białka w wątrobie samic z grupy doświadczalnej (243,59 um2+/-262,43) było porównywalne do obliczonego w wątrobie samic z grupy kontrolnej (403,10 um2+/-215,91)(p=0,38). W niniejszym doświadczeniu dawka L-argininy podana samicom szczura była zbliżona do dawki podawanej kobietom w ciąży powikłanej gestozą. Doświadczenie wykazało, że dawka ta nie wywołuje apoptozy hepatocytów, w której sygnał do indukcji przebiega drogą zewnętrzną przez aktywację kaspazy 8.